炎德英才大联考 长沙市一中2024届高三月考试卷(八)8试题(生物)，目前2024届百校联盟答案网已经汇总了炎德英才大联考 长沙市一中2024届高三月考试卷(八)8试题(生物)的各科答案和试卷，获取更多{{papers_name}}答案解析，请在关注本站。

+基因s基因5000bp基因表达量2000bp+基因s基因图1图224.(14分)胰岛素促进因子(PDX-1)能诱导干细胞分化为胰岛细胞，为糖尿病的治疗提供了新的思路。科研人员欲构建PDX-1基因的克隆载体用于诱导干细胞分化。回答下列问题：(1)RNA的提取：培养小鼠胰岛瘤细胞，待培养至贴壁80%左右时，用磷酸盐缓冲液洗涤细胞，经胰蛋白酶消化后加入过量新培养液，取一定量的细胞破碎离心，提取RNA。其中磷酸盐缓冲液的作用是▲，加入胰蛋白酶是为了▲，加入过量新培养基是为了▲。(2)cDNA的合成：从▲中检索小鼠PDX-l基因的mRNA序列，设计上下游引物并在引物的▲端分别添加Hind III和BamHI限制酶切序列。以提取的RNA为模板进行逆转录，为防止RNA被水解，需要在逆转录体系中加入▲。然后进行PCR扩增，取PCR产物进行凝胶电泳。(3)克隆载体的构建：回收凝胶中目的基因片段，,HimdΠ并进行纯化。选用的克隆载体结构如右图所/BamH I示，其中lacZ基因编码产生的酶可以分解培养基中的X-gl,产生蓝色物质，使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色。用▲酶将cDNA氨苄青霉素抗性基因纯化物与该克隆载体连接形成重组DNA分子。ori复制原点重组的效率除了与温度、pH等外界环境因素有克隆载体关，还与▲等有关。将重组DNA分子导入用▲处理过的感受态大肠杆菌中进行转化，将转化后的大肠杆菌用玻璃刮刀接种于含▲的LB固体培养基中，37℃恒温培养箱中培养24，其中▲色菌落为阳性克隆。(4)科研人员将含有PDX-1基因的腺病毒载体转染人的干细胞，使其分化为胰岛β细胞，该过程中▲基因得到了表达。该细胞可用于治疗由▲引起的糖尿病。25.（12分)损伤引发的适度炎症反应可有效地抵御病原体入侵，促进创伤恢复，但过度高三生物试题卷第7页共8页